Имеется 16-битный exe файл.
Нужно изменить его кодовый сегмент.
Как создать новый exe файл, который
будет отличаться от старого на одну
ассемблерную команду ?

Как заменить команду

mov di, 0

на

mov di, 1

В SoftIce'е это место выглядит так:
1234:5678 mov di, 0

ZverA
Если имидж не запакован, не закриптован, не содержит хитроумную защиту от модификации, тогда всё просто:

• Примечаешь в SoftIce хекс-значения ДО "mov di, 0" и/или ПОСЛЕ "mov di,0"
  
• Открываешь имидж в HIEW, WinHex, ...
  
• Задаёшь поиск тех самых хекс-значений
  
• Модифицируешь найденный фрагмент
  
• Сохраняешь изменения

Всё ещё проще:
В HiEW жмёшь F5 и вбиваешь виртуальный адрес команды,
потом F3 и вбиваешь нужный байт, потом F9-сохранить изменения.
Кстати можно это сделать и в режиме дизассемблера, если после
F3 нажать F2.